Anim. Res. 54 (2005) 289-295
DOI: 10.1051/animres:2005021

Elisa testing of brain and spleen homogenates for transmissible spongiform encephalopathy / scrapie of sheep

Hendrik De Bosschere, Stefan Roels and Emmanuel Vanopdenbosch

Department of Biocontrol, Veterinary and Agrochemical Research Centre (VAR), National Reference Laboratory for Veterinary TSE (Belgium and Luxemburg), Groeselenberg 99, B-1180 Brussels (Ukkel), Belgium

(Received 16 March 2004; accepted 11 February 2005)

Abstract - A diagnosis of TSE / scrapie in sheep is based on a positive ELISA of the obex, which is confirmed by confirmation tests, such as histopathology, immunohistochemistry, electronmicroscopy (scrapie associated fibrils (SAF)) and Western blot. However, preclinical scrapie cases may only be detected 3 months before the onset of symptoms based on a positive ELISA of the obex, while a 1.5 year preclinical diagnosis can be obtained based on a positive immunostaining of the lymphoid tissue (tonsil, spleen, lymph node, third eyelid) with other tests on the brain tissue still being negative. The brain tissue and spleen of positive (clinical and preclinical) and negative scrapie sheep were examined with immunohistochemistry, ELISA and Western blot. In most cases, all tests were consistent for the same tissue. It can be concluded that with minor adaptations of the ELISA technique, ELISA on the lymphoid tissue of sheep are as reliable, easier and quicker to perform than immunohistochemistry. This can be of importance in epidemiosurveillance, i.e. the detection of infected (clinical cases and preclinical cases), and the eradication and spread of the disorder within the population.

Résumé - Utilisation de la technique ELISA sur des homogénats de cerveau et de rate pour diagnostiquer l'encéphalopathie spongiforme transmissible / tremblante chez les moutons. Le diagnostic de la tremblante chez les moutons est fondé sur un test ELISA positif, pratiqué sur des échantillons d'obex, suivi d'un test de confirmation par histopathologie, immunohistochimie, microscopie électronique (protéines fibrillaires associées à la tremblante (SAFs)) ou Western-blot. Alors que le diagnostic préclinique de tremblante ne peut être posé que 3 mois avant le début des premiers symptômes avec les tests de type ELISA, il existe un dépistage précoce qui peut être réalisé un an et demi avant l'apparition des premiers signes cliniques. Ce dépistage est basé sur une analyse immunohistochimique des tissus lymphoïdes (amygdale, rate, ganglion, troisième paupière) et donne des résultats positifs alors que les tests classiques sont négatifs sur le tissu cérébral. Une étude a été menée afin d'examiner et de comparer les résultats obtenus par immunohistochimie, ELISA et Western-blot sur le tissu cérébral et la rate de moutons diagnostiqués positifs (cliniques et précliniques) ou négatifs à la tremblante. Dans la plupart des cas, les différents tests réalisés sur un même tissu ont donnés des résultats concordants. La technique ELISA et son application aux tissus lymphoïdes de moutons a donc été aussi fiable, plus facile et plus rapide que l'immunohistochimie. Ceci peut être d'importance pour l'épidémiosurveillance de la tremblante, c'est-à-dire la détection des moutons infectés (cas cliniques et précliniques), dans le but d'éradiquer la tremblante chez les ovins.

Key words: sheep / scrapie / ELISA / brain / spleen

Mots clés : mouton / tremblante / ELISA / cerveau / rate

Corresponding author: Hendrik De Bosschere hedeb@var.fgov.be

© INRA, EDP Sciences 2005